法氏囊抗體檢測采用法氏囊抗原作固相抗原檢測雞血清中的特異性法氏囊抗體。本試劑靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。
法氏囊抗體檢測的操作程序
1. 樣本稀釋：用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清+500ul樣本稀釋液，充分混勻。陰、陽對照不用稀釋。
2. 加樣反應(yīng)：樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔，取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液(2號液)一滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
3. 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
4. 顯色反應(yīng)：加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)一滴，混勻，終止反應(yīng)(加終止液后藍色會變?yōu)辄S色)。
法氏囊抗體檢測的結(jié)果判斷
1.肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標本為陽性。
2.儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。
法氏囊抗體檢測的注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。
