流式雙標(biāo)的收集及保存方法: 1:病理標(biāo)本收集及保存:
1)冰凍切片:取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于液氮保存;
2)石蠟切片:取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于4%多聚甲醛保存;
3)細(xì)胞爬片:細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定30min,換PBS浸沒4℃保存。
2:分子生物學(xué)標(biāo)本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)石蠟標(biāo)本:常溫保存;
3)全血標(biāo)本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
4)體液標(biāo)本:高速離心取沉淀;
5)細(xì)胞標(biāo)本:細(xì)胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
3:蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)全血標(biāo)本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
3)細(xì)胞標(biāo)本:細(xì)胞加細(xì)胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
4:ELISA、放免、生化實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存:
1)血清(血漿)樣本:取全血加入促凝管(抗凝管),2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存;
2)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液參照此實(shí)行;
3)細(xì)胞樣本:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS稀釋細(xì)胞懸液,通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清同上;
4)組織樣本:切割標(biāo)本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>
5:代謝組學(xué)標(biāo)本收集:
1)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等參照此實(shí)行;
2)組織樣本切割標(biāo)本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>